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流感解析／新流感8段基因 至少重組3次

2009/06/15

【聯合報╱本報記者林宜靜、陳惠惠】

專家提出警告，H1N1新型流感尚未發威，今年秋冬才是進入對抗病毒的關鍵期。

現在，全球都在準備製造疫苗應戰，在世界衛生組織主導下，部分疫苗工廠已清出生產線製造H1N1新流感疫苗。

中研院生醫所研究員何美鄉解釋，病毒之不斷演進突變，原因在於當不同病毒感染同一細胞，不論是人或動物，不同病毒的基因會在同一宿主體內重組，在重組過程，不同病毒的基因會互換，最終仍是8個基因，但排序改變，部分基因甚至可能在重組時被換掉。

分析H1N1新流感病毒，有4種基因來源，分別是北美洲的豬、北美洲禽類、歐亞的豬與人類。

簡單的假設，若病毒的底基是北美的豬，透過不同感染途徑，至少歷經三次重組，取得其他三種不同的病毒，因此N1H1是一株「三重組」病毒。

在正常狀況下，當病毒感染細胞時，細胞會產生一種干擾素，第一型干擾素會使病毒含量降低，同時透過一系列訊息傳導，使受感染細胞的周遭會出現第二型干擾素，建立細胞讓病毒不容易侵入。

但流感病毒的8段基因中，最小的NS基因含兩種蛋白質NS1、NS2，其中NS1蛋白質在病毒繁殖過程完全用不上，它的作用就是干擾細胞產生干擾素，這會使病毒容易繁殖並侵入其他細胞，進而傳播擴散。

新型H1N1病毒為何如此演進、重組，目前並不清楚。何美鄉說，有一種可能性，是這株病毒的NS1蛋白質功能特別強，壓抑細胞產生干擾素，導致病毒容易入侵、傳播，並協助第二個病毒感染同一個細胞，增加各種病毒重組的機會。新型H1N1未來究竟會怎麼樣變下去？科學家非常關注。






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流感解析／製流感疫苗 偽造病毒又快又好

2009/06/15

【聯合報╱本報記者林宜靜、陳惠惠】

從1930年代起，人類已開始使用雞胚胎培養病毒，迄今絕大部分流感疫苗仍利用雞胚胎培養、製造。

中央研究院生物醫學研究所研究員何美鄉解釋，不同病毒在雞胚胎增殖速度不一，科學家找到在雞胚胎裡長得最快、「適化」最好的病毒，做為製備疫苗株的基因母體。

1930年代，在波多黎各分離出來的PR8流感病毒，是目前醫學上製備流感疫苗最常使用的母體。這株流感病毒在雞胚胎適化後，利用其H與N以外的6段基因，做為所有疫苗株的基因母體，製造基因重組的各式疫苗株。

製造疫苗的程序，首先讓預期使疫苗對抗的病毒株與PR8一起感染細胞，其後在細胞外面加上抗PR8的抗體，因此任何含有PR8的H和N基因的病毒都會被剔除。

因PR8病毒增長速度快、數量龐大，發生突變導致病毒重組的機率亦高，此過程中只要有任何新的H或N基因出現，帶有此突變基因的病毒就可不受抗PR8的抗體影響而繼續增殖，譬如以此方法找到的H3N2就是新的疫苗株。







篩選出的疫苗株，需要先進行簡單的活體毒性試驗，試驗方法通常是將疫苗株打入雪貂活體觀察感染反應，若不會感染雪貂則證實其感染性很低，感染人類的機率亦不高，其後才可利用該病毒株製疫苗。

當疫苗製備廠拿到WHO釋出的疫苗株，會先進行「種株」（master）病毒培育，培養出一定濃度與標準化的病毒量後，才注入雞胚胎裡以製造疫苗。

專門培育用以生產雞胚胎蛋的雞，從小施打各種疫苗以確保個體健康；雞舍的空調、工作人員進出都受嚴格管制。雞蛋生下30分鐘內必須清洗消毒，然後挑出受精卵進行孵化至第11天，該卵即可發育成適用於培養病毒的雞胚胎。運送「胚胎蛋」到疫苗廠過程，因雞蛋已開始發育，卡車須要有空調並防震。

疫苗製造的程序，是先將培養出的特定病毒打到胚胎蛋中，令其繼續孵化兩天，再讓雞蛋冷卻，使雞胚胎死亡，以免稍後抽取蛋中的病毒時，裡面的活體胚胎扭動干擾作業。接著進行純化，將病毒以外的雜質完全去除只留下病毒顆粒，此程序約需5至7天，純化後將病毒殺死，固定病毒蛋白後放入針劑中，最後整批次製備的針劑必須通過無菌檢驗才算完成疫苗製備。

傳統疫苗株製造所需時間較長，目前科學家已可運用分子生物學技術，省略培養、繁殖病毒的冗長階段，直接篩選出擬對抗的病毒基因，偽裝成病毒用以製備疫苗，一樣可達目的，全程只需10到12周。

流感疫苗 國光生技兩周內量產

【經濟日報╱記者謝柏宏／台北報導】
2009.06.02 02:29 am



本土唯一疫苗廠國光生技公司昨（1）日表示，該公司已自澳洲取得A（H1N1）疫苗株，本周將繼續取得第二、三支疫苗株，估計最快兩周內做好量產規劃。依衛生署所訂時程，國光最快9月底應能完成750萬劑流感疫苗的量產。

國光公布，該公司已在5月31日取得澳洲A（H1N1）疫苗種株，這星期也將收到來自英國NIBSC及美國CDC等疾病管制單位的疫苗種株，這些疫苗株將在生物安全等級標準達到二級（BSL2+）的種毒實驗室進行篩選，預計二周內可挑出最適合量產的疫苗株。

國光表示，該公司5月底已完成新流感疫苗廠建廠及內部驗證，正進行加強品質及生物安全管理規範，並啟動A（H1N1）疫苗生產計畫，將製造先導疫苗，供作前臨床的動物試驗及人體臨床試驗用。

依照國光原本的規劃，這座以雞胚胎為原料的流感疫苗廠，原本被規劃為歐洲疫苗廠代工，出貨前都需經過歐盟相關單位的認證，並進行查廠及小型臨床試驗，估計至少要一年時間才有可能正式量產。

國內其他生技業者很好奇，若要達到政府要求的750萬劑流感疫苗量產目標，國光必須迅速採購二、三百萬顆SPF（無特定病原）雞蛋，做為疫苗生產的原料，對國光而言也是項考驗。但國光強調，如果政府基於戰備需要，向國光生技徵召新廠使用，並由主管機關決定認證時程，國光有信心在三到六個月內，生產2,400萬劑流感疫苗。

【2009/06/02 經濟日報】@

http://www.tssdnews.com.tw/?FID=10&CID=61804

國際藥廠宣布：新流感疫苗生產成功了

【記者蘇湘雲／台北報導】 2009/06/16台灣新生報

國際藥廠宣布，成功透過細胞組織培養技術生產出新流感（A/H1N1）疫苗，較預計時程提早了數周。相較於雞胚細胞培養疫苗採用傳統疫苗生產技術，該藥廠研發人員採用細胞培養技術，一旦成功分離出大流行的病毒株，即可開始生產疫苗，毋需先讓病毒株適應在雞胚的生長環境中。這項技術能夠將疫苗開始生產的時間提前數周。

該藥廠細胞組織培養疫苗生產基地位於德國馬爾堡(Marburg,Ger-many)。新型細胞培養技術不僅有生產速度上的優勢，還能夠迅速提高產量，將產能擴大到每周數百萬劑。藉由與美國衛生與公共服務部合作，第二個細胞組織培養基地正在美國北卡羅萊納州聖泉市(HollySpring,NorthCarolina,USA)建造。

在野生型病毒株成功生產出疫苗的基礎上，藥廠預期能夠用美國疾病管制中心5月27日所提供的重配病毒株快速、大規模地生產出新流感疫苗。預計於7月開始疫苗的臨床試驗，並於2009年秋季獲得產品註冊。

超過30個國家的政府已經向該藥廠提出要求供應新流感疫苗。美國衛生與公共服務部已於2009年5月與該藥廠簽下2.89億美元的訂單，這也是美國政府對於新流感疫苗的最大訂單。

訂單包括諾華的專利佐劑，這種佐劑可以添加到流感疫苗中，以提高人體對疫苗的免疫反應；2009年4月在美國國家科學院院報發表的資料確證了這種佐劑潛在的廣泛適用性。

含這種佐劑的季節性流感疫苗自1997年經歐盟核可上市以來，亞太區的新加坡、菲律賓、泰國、中國、香港、澳洲和紐西蘭均已引進多年，台灣正在登記註冊當中。

新流感持續升溫，國內藥物跟疫苗究竟夠不夠用，成為全民最關心的話題，不過對於國內自行研發的新流感疫苗，有專家說根本不敢用，還不客氣的說寧可吃藥也不打疫苗，前任衛生署長陳建仁也認為，試驗似乎不夠，讓民眾對新流感疫苗該不該打？又產生疑慮。


流感疫情升溫，衛生署下令，8月15日開始，醫院診所都必須有一套快篩投藥機制，民眾大表支持，不過對於疫苗研發，專家學者可不賞臉。


前疾管局局長蘇益仁就嗆聲，這次疫苗臨床實驗樣本只有200人，6月才研發過程倉促，恐怕還有神經後遺症的問題，讓他只敢吃藥不打疫苗。


消息傳到前衛生署長陳建仁耳裡，怎麼看？

陳建仁說，3月就在提倡自製疫苗，沒想到衛生署6月才動作，暗批葉金川慢半拍。


國內唯一生產疫苗的國光生技表示，量產後決定先打員工，要給外界掛保證，只是如果出問題，那麼全台將陷入無疫苗可打的困境，衛生署賭上國光這條路，不光是官員學者，兩派爭鋒相對，國產的疫苗，打了安不安全？

國光生技信心滿滿，替自己的產品打包票，反倒是防疫總指揮官衛生署長葉金川被問到疫苗，說不方便回答。


前衛生署長陳建仁：「評估的部分是這樣，他從動物實驗看它有沒有毒性。」

劈頭先講疫苗試驗的正確流程，前朝衛生署長陳建仁，對台灣要量產新流感疫苗，似乎有話要說。陳建仁：「美國，曾經在一次量產豬瘟型的流行性感冒接種的過程當中，發現有神經炎病變症候群出現，這個症狀一出現的時候，有些人有相當嚴重的神經病變，所以對國光來說，確實是一個很大的挑戰。」

一句「很大的挑戰」，點出陳前署長的疑惑，實在是因為，國光生技第一次製造流感疫苗，9月底前量產500萬劑，緊接著人體實驗，11月讓民眾施打問題是，臨床實驗只有2個月，比合理的3個月試驗時間，還要快！

而且拿澳洲之前量產疫苗來說，共有400個兒童和240位成年人，投入試驗，反觀台灣150個兒童加200個成年人，的確少了些，樣本數夠不夠，當然受到質疑。記者：「針對施打疫苗？」衛生署長葉金川：「我不方便，我不方便回答。」

葉金川沒辦法回答的，前疾管局長蘇益仁和陳建仁倒是都公開發表過意見，對國光趕工量產，實在不太有信心，

世界衛生組織指出，根據研究顯示，孕婦是Ｈ１Ｎ１新型流感的高風險群，因此建議各國在疫苗生產出來後，把懷孕婦女列為最優先注射的對象。


世衛組織說，美國及其他國家的研究發現，孕婦一旦感染新流感病毒，容易出現嚴重甚至致命病情，而胎兒死亡或自然流產的風險也會升高。因此建議各國衛生部門應將孕婦列為新流感疫苗的重點接種對象，並對發病者進行及時的抗病毒藥物治療。


世衛組織說，在新流感已形成大範圍傳播的國家，孕婦本身以及她們的醫生應該密切關注任何類似於流感的症狀，一旦出現症狀，應該不必等待實驗室的檢測結果，就儘早使用抗病毒藥物進行治療。


世衛組織說，目前新流感病毒並沒有太大變化，世界各地的大多數患者仍然發病較輕，一般可在一星期之內康復。